Metody molekulární biologie Bi6400

Tento předmět patří mezi povinně volitelné a lze jej absolvovat v jarním semestru. Průběžně sem budu přidávat informace z přednášek. Mezitím si můžete níže prohlédnout osnovu předmětu. Postupně budu doplňovat i výpisky, které budou vycházet hlavně z přednášek prof. Šmardy, Pantůčka a dalších. Katalog předmětu (a tedy i další informace) najdete na tomto odkazu.

1. Manipulace s nukleovými kyselinami, centrifugace, enzymové úpravy in vitro.

2. Elektroforetická a elektronmikroskopická analýza nukleových kyselin.

3. Hybridizace nukleových kyselin: příprava nukleotidových sond, značení nukleových kyselin.

4. Restrikční analýza nukleových kyselin, konstrukce restrikční mapy, mapování genomů.

5. Sekvenční analýza nukleových kyselin, genomové sekvencování.

6. Charakteristika základních typů vektorů a jejich aplikace.

7. Klonovací strategie: přenos DNA do bakteriálních a eukaryotických buněk, stanovení přítomnosti produktů klonovaných genů v buňkách: elektroforéza proteinů a western blotting, testy aktivity luciferázy a ß-galaktozidázy.

8. Zakládání genových knihoven.

9. Průtoková cytometrie.

10. Transkripce a translace in vitro.

11. Polymerázová řetězcová reakce. Základní metody molekulární diagnostiky.

12. Analýza proteinů: elektroforéza v jednom a dvou rozměrech, imunoprecipitace, fokuzace.

13. Příprava a využití monoklonálních a polyklonálních protilátek.

14. Analýza interakcí mezi proteiny a nukleovými kyselinami: retardační analýza, footprinting.

Literatura:

ŠMARDA, Jan, Jiří DOŠKAŘ, Roman PANTŮČEK, Vladislava RŮŽIČKOVÁ a Jana KOPTÍKOVÁ. Metody molekulární biologie. 1. vyd. Brno: Masarykova univerzita, 2005. 194 s. 1. vydání. ISBN 80-210-3841-1.

Žádné komentáře:

Okomentovat